- 血清熱滅活對細(xì)胞的影響
- 點(diǎn)擊次數(shù)：3820 更新時(shí)間：2016-03-10
Pinyopummintr等證明血清去除滅活步驟不影響牛胚胎的發(fā)育分化；有研究結(jié)果證實(shí)熱滅活步驟減弱了胎牛血清和小牛血清對細(xì)胞的促粘附作用，在用SV-BHK、BALB-3T3、CV－1、FS-4細(xì)胞對細(xì)胞粘附實(shí)驗(yàn)中，熱滅活對胎牛血清的影響小于對小牛血清的影響。
我們調(diào)查了熱滅活對胎牛血清以及對其中不同細(xì)胞株生長能力的影響。通過比較11個(gè)不同細(xì)胞株，發(fā)現(xiàn)其中熱滅活對6個(gè)細(xì)胞株（HBAE，MDBK，Vero，成纖維細(xì)胞，MRC-5）的生長帶來負(fù)面影響，三個(gè)細(xì)胞株（FOX-NY，MDCK和CHO-K1）不受熱滅活的影響，而只有兩個(gè)細(xì)胞株（Balb/3T3，Sp2/0Ag14 hybrid），在熱滅活之后，細(xì)胞生長有輕微的改善。所以，在正常的操作下，熱滅活通常對細(xì)胞的生長沒有明顯的促進(jìn)作用。在正常操作下，熱滅活經(jīng)常給血清產(chǎn)品帶來負(fù)面的影響，對血清的加熱經(jīng)常導(dǎo)致血清中沉淀的產(chǎn)生，而導(dǎo)致的沉淀又常常被認(rèn)為是微生物的污染。注意到這個(gè)現(xiàn)象之后，為了驗(yàn)證污染的存在，或者促進(jìn)沉淀的溶解，許多培養(yǎng)者往往將血清放置37℃溫育。這卻往往使情況變得更糟，血清中的蛋白進(jìn)一步的析出，為了確信血清未被污染，進(jìn)行的鏡檢，無菌培養(yǎng)試驗(yàn)，和革蘭氏染色試驗(yàn)更是浪費(fèi)了實(shí)驗(yàn)者大量的時(shí)間和精力。
總之，多數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)中血清的熱滅活并不是必要的。很多場合下，熱滅活并不會改善細(xì)胞的生長，卻降低了支持細(xì)胞生長的能力。即使在少數(shù)有促進(jìn)的情況下，其促進(jìn)的比率也是微不足道的。另外，血清的熱滅活導(dǎo)致的沉淀常常被認(rèn)為是微生物的污染，從而給用戶和供應(yīng)商都帶來不必要的麻煩。我們建議，對于那些對血清進(jìn)行滅活的用戶，需要通過試驗(yàn)來證實(shí)其必要性，確定滅活的適當(dāng)條件；在滅活過程中，需要嚴(yán)格認(rèn)真監(jiān)測，并選擇一個(gè)可重復(fù)的方案進(jìn)行操作。
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